Histopathological and immunophenotypical characterization of canine multicentric lymphoma in Brazil: a study of 203 cases / Caracterização histopatológica e imunofenotípica do linfoma multicêntrico canino no Brasil: um estudo de 203 casos

The immunophenotype is regarded as an independent prognostic factor in high-grade lymphomas, seeing that lymphomas of T-cell origin are associated with shorter survival time. Although a number of studies have evaluated the immunophenotypical profile of lymphoma in the USA and Europe, Brazilian research on the matter remains scarce. Exact characterization of the histopathological type is crucial to establish proper treatment and prognosis. This study evaluated the database of immunohistochemistry laboratories that perform immunophenotyping of canine lymphoma in Brazil. A total of 203 cases of multicentric lymphoma were classified according to the WHO classification. Immunophenotyping was able to identify 71.4% lymphomas of B-cell line, 27.1% of T-cell line and 1.5% of non-B cells and non-T cell lines. Diffuse large B-cell lymphoma was the most common with 59.1% of the cases. Among T-cell lymphomas, lymphoblastic was the most common (11.33% of the cases). Even though canine lymphomas tend to be high-grade, indolent lymphomas comprised 11.82% of the cases and T-zone lymphoma was the most prevalent (8.86%). The immunophenotype of multicentric lymphoma in Brazil is similar to those in other parts of the world, which suggests similar etiologic factors to the development of this disease.(AU)

O imunofenótipo é considerado um fator prognóstico independente em linfomas de alto grau, visto que os linfomas de origem de células T estão associados a menor tempo de sobrevida. Apesar de vários estudos terem avaliado o perfil imunofenotípico do linfoma nos EUA e na Europa, a pesquisa brasileira sobre o assunto ainda é escassa. A caracterização exata do tipo histopatológico é crucial para estabelecer o tratamento e o prognóstico adequados. Este estudo avaliou a base de dados de laboratórios de imuno-histoquímica que realizam imunofenotipagem do linfoma canino no Brasil. Um total de 203 casos de linfoma multicêntrico foi classificado de acordo com a classificação da OMS. A imunofenotipagem foi capaz de identificar 71,4% dos linfomas da linhagem de células B, 27,1% da linhagem de células T e 1,5% das linhagens de células não B e não T. O linfoma difuso de grandes células B foi o mais comum em 59,1% dos casos. Entre os linfomas de células T, o linfoblástico foi o mais comum (11, 33% dos casos). Embora os linfomas caninos tendam a ser de alto grau, os linfomas indolentes representaram 11,82% dos casos e o linfoma da zona T foi o mais prevalente (8,86%). O imunofenótipo do linfoma multicêntrico no Brasil é semelhante ao de outras partes do mundo, o que sugere fatores etiológicos semelhantes ao desenvolvimento dessa doença.(AU)

Quantification of Treg cells in peripheral blood and lymph nodes of dogs with multicentric lymphoma / Quantificação de células Treg no sangue periférico e linfonodos de cães com linfoma multicêntrico

Lymphoma is a malignant tumor characterized by cell proliferation of lymphoid origin and corresponds to 90% of all hematopoietic neoplasms of dogs. Regulatory T cells (Tregs) have been the target of many investigations in oncology due to their potential of down-regulating immune responses, as well as ensuring the maintenance of active mechanisms of tumor suppression. The aims of the present study were to compare the percentage of Tregs in peripheral blood between dogs with multicentric lymphoma and healthy animals, together with the percentage of Tregs in peripheral blood and lymph nodes of dogs with multicentric lymphoma. Twenty-six animals were enrolled in the study: 10 healthy dogs comprised the control group (CG) and 16 dogs with multicentric lymphoma comprised the Lymphoma Group (LG). We observed that dogs in the LG showed a significantly higher Tregs expression in peripheral blood compared to the CG. No significant difference was observed between Tregs expression in lymph nodes and peripheral blood of the LG, however. With these results, it is possible to conclude that multicentric lymphoma is a neoplasm with high Tregs expression, which poses this as a condition of interest when investigating treatments that can suppress Regulatory T cells.(AU)

O linfoma é uma neoplasia maligna caracterizada pela proliferação neoplásica de células originadas de tecido linfoide e corresponde a cerca de 90% das neoplasias hematopoiéticas em cães. Células T reguladoras (Tregs) têm sido alvo de diversas investigações na área da oncologia devido ao potencial de regulação negativa da resposta do sistema imune e à manutenção ativa do mecanismo de imunossupressão tumoral. O objetivo do presente estudo foi a comparação da porcentagem de Tregs no sangue periférico entre cães com linfoma multicêntrico e animais saudáveis e a porcentagem de Tregs no sangue periférico e nos linfonodos de cães com linfoma multicêntrico. Foram utilizados 26 animais: 10 cães saudáveis, como grupo controle (CG), e 16 cães com linfoma multicêntrico, como grupo linfoma (LG). Observou-se maior expressão de Tregs no sangue periférico de cães do LG em comparação ao CG. Entretanto, não foi observada diferença significativa entre as expressões de Treg nos linfonodos e no sangue periférico do LG. Com esses resultados, foi possível concluir que o linfoma multicêntrico apresenta alta expressão de Tregs, tornando-se condição interessante para o estudo de tratamentos capazes de suprimir as células T reguladoras.(AU)

Plasmocitoma extramedular em bulbo peniano de cão: relato de caso / Extramedullary plasmacytoma in the penile bulb of a dog: case report

O objetivo deste relato de caso é descrever a ocorrência de plasmocitoma em bulbo peniano de um cão, classificado como uma doença extramedular não cutânea de localização rara e casuística inédita. Um cão, sem raça definida, com sete anos de idade e pesando 15kg, não castrado, apresentou histórico clínico de anorexia, vômitos, anúria e constipação. Ao exame específico da genitália externa, foi encontrada uma massa em bulbo peniano durante a inspeção do prepúcio, aderida à pele e encapsulada, extremamente firme e arredondada, medindo cerca de 6cm de diâmetro. Por meio da ultrassonografia dessa estrutura, foi observado aumento do volume regional com ecotextura heterogênea e ecogenicidade mista, além de neovascularização tecidual ao Doppler colorido. Foi realizada biópsia da massa, sendo verificada a presença de neoplasia de células redondas. A caracterização do tumor foi realizada pela imuno-histoquímica, e as células neoplásicas foram imunoexpressas para CD79a e MUM1, indicando o diagnóstico de plasmocitoma extramedular. Embora os tumores penianos em cães sejam os predominantemente venéreos transmissíveis (TVT), e os plasmocitomas sejam neoplasias raras nessa localização, este relato de caso fornece com ineditismo a ocorrência de plasmocitoma extramedular em bulbo peniano de cão, condição ainda não descrita em veterinária.

Non-cutaneous extramedullary plasmacytomas are relatively rare in dogs, affecting mainly the oral cavity and bowel loops. The involvement of the penile bulb has not been described, a fact of great importance for obstetric and veterinary oncology. The aim of this case report is to describe the occurrence of plasmacytoma in a dog's penile bulb, classified as a non-cutaneous extramedullary disease of rare location and unpublished casuistry. A non castrated dog of undefined breed, with seven years of age and weighing 15kg, presented clinical history of anorexia, vomiting, anuria and constipation. By specific examination of the external genitalia, a penile bulb mass was found in the preputial inspection, which was adhered to the encapsulated skin, extremely firm and rounded, measuring approximately 6 cm in diameter. By ultrasound evaluation of the structure in the penile bulb an increase of regional volume with heterogeneous echotexture and mixed echogenicity and tissue neovascularization upon color Doppler was observed. Incisional biopsy of the mass was performed and showed the presence of neoplasia of round cells. The characterization of the tumor was performed by immunohistochemistry and the neoplastic immuno cells were expressed CD79a and MUM1, indicating the diagnosis of extramedullary plasmacytoma. Although the penile tumors in dogs are predominantly transmissible venereal tumors (TVT) and plasmocytomas are rare neoplasms in this location, this case report provides a novel occurrence of extramedullary plasmacytoma in the penile bulb of a dog, a condition not yet described in veterinary.

Regulatory T cells in dogs with multicentric lymphoma: peripheral blood quantification at diagnosis and after initial stage chemotherapy / Células T reguladoras em cães com linfoma multicêntrico: quantificação, em sangue periférico, no momento do diagnóstico e após etapa inicial do tratamento quimioterápico

Lymphoma is the most common hematopoietic malignancy in dogs and one of the most frequent among all neoplastic diseases in this species. It can occur in several anatomical locations with distinct histological and immunophenotypes. Depending on the host immune response towards the tumor, prognosis information could be collected. Because its well established immunosuppressant, antitumor activity, the function of regulatory T cells (Tregs) in canine neoplasias has been investigated. In this study, we sought to quantify, using flow cytometry, the Tregs subpopulation in peripheral blood of healthy dogs (10) and in those diagnosed with type-B (14) and type-T (8) multicentric lymphoma before (at diagnosis) and after the first cycle (5-week) of 19-week Madison-Wisconsin (MW) protocol of chemotherapy. Our results indicated that dogs with lymphoma showed higher percentage of Tregs (18,84±2,56) when compared to healthy dogs (4,70±0,50) (P<0,01). In addition, 5-week chemotherapy treatment reduced the Tregs subpopulation (7,54±1,08) to levels similar to control (4,70±0,50) (P>0,05). There was no difference in Tregs percentage between B-type (17,45±2,77) and T-type (21,27±5,27) lymphoma (P>0,05). With this, we conclude that canine lymphoma increases Tregs in the peripheral blood and the MW protocol of chemotherapy reduces this cell subpopulation to control values.

O linfoma é a neoplasia hematopoiética mais comum nos cães e uma das mais frequentes, dentre todas as neoplasias, nesta espécie. Apresenta-se em diversas localizações anatômicas e pode apresentar classificações histológicas e imunofenotipos distintos. Dependendo da resposta imune do paciente frente à instalação de um tumor, algumas informações sobre o prognóstico podem ser obtidas. Atualmente, as células T reguladoras (Tregs) vêm sendo estudadas em algumas neoplasias caninas, por seu comprovado potencial imunossupressor, principalmente por inibir a resposta antitumoral. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivos quantificar, por citometria de fluxo, as células Tregs em sangue periférico de cães com linfoma multicêntrico de imunofenótipos B e T, respectivamente 14 e 8 cães, no momento do diagnóstico e após o primeiro ciclo de quimioterapia antineoplásica com o protocolo Madison-Wisconsin (MW) de 19 semanas adaptado, e comparar com cães saudáveis (n=10), buscando quantificá-las em cães com linfoma de diferentes imunofenótipos antes e após a 5ª semana do protocolo MW. Os resultados mostraram que cães com linfoma apresentaram uma porcentagem significativamente maior de Tregs (18,84±2,56) quando comparada aos cães sem neoplasia (4,70±0,50) (P<0,01). Além disso, após a quinta semana de tratamento houve uma significante redução da população de Tregs (7,54±1,08), atingindo valores semelhantes a dos cães controle (4,70±0,50) (P>0,05). Não houve diferença nas Tregs em relação aos imunofenotipos B (17,45±2,77) e T (21,27±5,27) (P>0,05). Concluiu-se que o linfoma em cães leva a um aumento de células Tregs e que o tratamento com o protocolo quimioterápico MW reduz significativamente as células Tregs em sangue periférico, atingindo valores próximos aos dos cães saudáveis.

Establishment of peritoneal liquid electrophoretogram from healthy horses and horses submitted to experimentally induced intestinal obstruction / Estabelecimento do eletroforetograma do líquido peritoneal de equinos hígidos e daqueles submetidos à obstrução intestinal experimental

The initial inflammatory stages of the colic syndrome include changes known as acute phase response. The aim of this study was to contribute with the establishment of reference values concerning the electrophoretogram of peritoneal liquid from healthy horses and horses submitted to experimentally induced intestinal obstruction. Twenty-one horses were allotted in four groups: duodenal obstruction (DG), ileum obstruction (IG), left-dorsal colon obstruction (MG), and control group (CG). Peritoneal liquid was sampled before obtruction (T0), with 3 hours of obstruction (T3) and 6, 30, 102 and 174 hours after desobstructing (T6, T30, T102 and T174, respectively). Total protein levels were determined by the biuret method and protein fractions were obtained by SDS-PAGE electrophoresis. The acute phase proteins (APP) identified were Immunoglobulin-A, ceruloplasmin, transferrin, albumin, α1-antitrypsin, heavy and light chains of immunoglobulin-G, haptoglobin, α1-acid glycoprotein and a still unnamed protein, which was called P24. There was no difference (P>0.3) in protein levels among groups, although a significant difference (P>0.05) was observed between distinct experimental moments in each group evidencing a higher response of the APP in the obstructed groups. The APP fractioning of the peritoneal liquid was standardized to establish a standard curve for healthy equines and those submitted to induced intestinal obstruction. Moreover, it was verified that the SDS-PAGE electrophoresis was sensitive and effective to help diagnose abdominal inflammatory processes...

Na cólica equina, os estágios iniciais da inflamação incluem alterações denominadas resposta de fase aguda. O objetivo deste estudo foi contribuir para o estabelecimento de valores de referência do proteinograma do líquido peritoneal de equinos hígidos e daqueles submetidos à obstrução intestinal experimental. Vinte e um animais foram distribuídos nos grupos: obstrução de duodeno (GD), íleo (GI), cólon dorsal esquerdo (GM) e controle instrumentado (GC). As colheitas das amostras de líquido peritoneal foram realizadas antes (T0), durante as obstruções (T3) e após as desobstruções (T6, T30, T102 e T174 horas). A proteína total foi determinada pelo método do biureto, e as frações proteicas obtidas por eletroforese em SDS-PAGE. Identificaram-se as proteínas de fase aguda (PFA): IgA, ceruloplasmina, transferrina, albumina, α1-antitripsina, cadeias pesada e leve de imunoglobulina-G, haptoglobina, alfa-1-glicoproteína ácida e uma proteína nominalmente não identificada, que foi chamada P24. Não houve diferença (P>0.3) nas concentrações proteicas entre os grupos, somente entre tempos dentro de cada grupo (P>0.05), evidenciando uma resposta maior das PFA dos grupos obstruídos. O fracionamento eletroforético das PFA, presentes no líquido peritoneal, foi padronizado de modo a estabelecer a curva-padrão para equinos hígidos e para aqueles submetidos à obstrução intestinal; ademais, verificou-se que o referido fracionamento proteico mostrou-se sensível e eficaz no auxílio ao diagnóstico de processos inflamatórios abdominais...

Criptococose diagnosticada por imprints de lesões em mucosa oral em cão / Cryptococcosis diagnosed by imprints of oral mucosa lesions in dog

The present report provides a cryptococcosis case affecting a Poodle dog that primarily presented the disease in its cutaneous form, but rapidly evolved to neurologic form and subsequent death. The clinical-pathological diagnosis was established by the examination of cytologic preparations obtained through fine needle cytological aspiration (FNCA) from cutaneous nodules and by imprints of ulcerative lesions presented at the oral cavity. Thus, this case report showed the importance of using other clinical-laboratorial diagnostic methods for cryptococcosis, especially of those preparations obtained from imprints of mucocutaneous ulcerative lesions.

Características celulares e bioquímicas do líquido peritoneal de equinos submetidos à obstrução experimental do duodeno, íleo e cólon maior / Cellular and biochemical characteristics of peritoneal fluid of equines submitted to experimental obstruction of duodenum, ileum, and large colon

Estudaram-se as características macroscópicas, bioquímicas e citológicas do líquido peritoneal de equinos submetidos a um modelo experimental de obstrução intestinal em 24 animais, distribuídos em grupos: de controle instrumentado (GI), de obstrução do duodeno (GII), de obstrução do íleo (GIII) e de obstrução do cólon maior (GIV). As amostras de líquido peritoneal foram colhidas antes da cirurgia (T0), durante as obstruções (T60i-T180i) e após as desobstruções (T60ri-T7º ). Durante o período obstrutivo, não foram observadas alterações significativas nos parâmetros bioquímicos e citológicos avaliados no líquido peritoneal dos animais. Após as desobstruções, apenas os animais de GII e GIII apresentaram resposta inflamatória mais intensa, caracterizada por maior contagem global e diferencial de leucócitos e dos valores de proteína total, fibrinogênio, lactato e fósforo inorgânico. As alterações laboratoriais não foram associadas a sinais clínicos indicativos da presença de processo inflamatório abdominal, demonstrando que os resultados da análise do líquido peritoneal, apesar de auxiliarem no acompanhamento da evolução do processo de cura, não devem ser utilizados isoladamente na elaboração do diagnóstico e do prognóstico de complicações no pós-operatório de equinos com cólica.

The macroscopic, biochemical, and cytological characteristics of peritoneal fluid of equines submitted to intestinal obstruction using an experimental model were evaluated. Twenty-four animals were distributed in four groups: instrumented control (GI), duodenum obstruction (GII), ileum obstruction (GIII), and large colon obstruction (GIV). Peritoneal fluid samples were collected before the surgery (T0), during the obstruction (T60i-T180i), and after unblocking procedures (T60ri-T7º ). During obstructive period, significant alterations were not observed in biochemical and cytological examination of peritoneal fluid of all animals. After unblocking procedure, animals from GII and GIII presented intense inflammatory response characterized by higher global and differential leukocytes counts, as well as in fibrinogen and total protein concentrations; lactate and inorganic phosphorus concentrations in peritoneal fluid were also increased. The laboratory alterations were not associated with clinical signs, indicative of the abdominal inflammatory process presence. Results showed that analyses of peritoneal fluids can be used as support in the evolution of healing process. However, they can not be isolated used for a diagnosis and prognosis of equine postoperative complications.